Coombs testas

Kas yra „Coombs“ testas?

Coombs testas naudojamas nustatyti antikūnus prieš raudonuosius kraujo kūnelius (eritrocitus). Antikūnams nustatyti naudojamas vadinamasis Coombs serumas. Jis gaunamas iš triušių serumo ir yra jautrus žmogaus antikūnams.
Tyrimas naudojamas, jei yra hemolizinė anemija, nesuderinamas rezusas arba prieš pat įtariant kraujo perpylimą. Hemolizinė anemija yra anemijos forma, o rezo nesuderinamumas apibūdina kraujo grupės nesuderinamumą.
Yra du skirtingi Coombso bandymo tipai. Tiesioginis ir netiesioginis testai skiriasi indikacijos ir vykdymo prasme.

Coombso testo priežastys

Jei įtariama hemolizinė anemija, naudojamas tiesioginis Coombs testas. Hemolizinė anemija apibūdina anemiją, kai kraujo ląstelės per anksti suyra dėl pažeidimo.
Esant autoimuninėms ligoms, tokioms kaip sisteminė raudonoji vilkligė, reumatoidinis artritas ar lėtinė limfocitinė leukemija, susidaro antikūnai, nukreipti prieš paties organizmo kraujo ląsteles (vadinamuosius eritrocitus). Antikūnų surišimas lemia ankstyvą kraujo ląstelių suskaidymą arba kraujo ląstelių susikaupimą induose. Abu šie atvejai lemia hemoglobino vertės sumažėjimą.

Kita tiesioginio Coombs testo indikacija yra haemolyticus neonatorum liga, čia rezus negatyvo turinčios motinos kūne susidaro antikūnai prieš rēzus faktorių. Jei negimusiam vaikui yra teigiamas rezus, motinos antikūnai gali patekti į vaisiaus kraujotaką ir pradėti didesnį kraujo ląstelių suskaidymą. Naujagimiai išsiskiria sunkia anemija ir gelta.

Coombs testas reguliariai naudojamas transfuzijos medicinoje. Jis naudojamas nustatant kraujo grupes prieš atliekant kraujo perpylimą (tyrimas prieš lovą), kurio metu nedidelis kraujo mėginys sumaišomas su įvairiais serumais iš A, B, AB ir 0 kraujo grupių. Jei kraujas išlieka skystas, paciento kraujas yra suderinamas su atitinkama kraujo grupe. Galima perpilti.

Netiesioginis Kombso testas taip pat gali būti naudojamas laisvų antikūnų paieškai paciento kūne (antikūnų paieškos testas), pvz. atliekant motinystės patikrinimus, ruošiantis perpilti onkologiniams pacientams ar žmonėms, kuriems jau atlikta kraujo perpylimas.

Sužinokite viską apie temą čia: Rh netoleravimas.

Preparatas

Ruošiantis Coombs tyrimui, pirmiausia paruošiami serumai su antikūnais, kuriuos reikia ištirti. Jie užpildomi į skirtingus mėgintuvėlius arba dedami į bandymo korteles.

Kasdieninėje klinikinėje praktikoje pvz. su bandymu prie lovos jau yra paruoštos bandymo kortelės, kuriomis galima nedelsiant naudotis. Tada iš paciento paimamas kraujas ir paruošiamas tyrimui. Priklausomai nuo to, koks Coombs tyrimas atliekamas, reikia paciento kraujo ląstelių arba serumo (skysto kraujo dalies).

Seka

Jei atliekamas tiesioginis Kombso tyrimas, raudonieji kraujo kūneliai filtruojami iš paciento kraujo. Turi būti patikrinta, ar ant jų nėra IgG tipo antikūnų, kurie organizme sukelia hemolizinę anemiją ar kraujo grupių nesuderinamumą. „Coombs“ serume yra antikūnų prieš žmogaus IgG antikūnus. Mišinys ilgai kaitinamas (inkubuojamas). Jei ant raudonųjų kraujo kūnelių yra antikūnų, jie sulipsta ir testas tampa teigiamas.

Netiesioginį Kombso testą sudaro dvi dalys. Tikslas yra nustatyti antikūnus, kurių kraujyje nėra laisvų ir neprisijungusių prie kraujo ląstelių.
Šį kartą skysta dalis (serumas) filtruojama iš paciento kraujo. Pirmiausia į serumą pridedami raudonieji kraujo kūneliai. Jei serume yra laisvų antikūnų, jie prisijungs prie raudonųjų kraujo kūnelių. Ši reakcija nėra matoma. Tik antrame etape, kaip ir atliekant tiesioginį „Coombs“ testą, „Coombs“ serumas pridedamas ir pašildomas. Jei sprendimas yra teigiamas, sprendimas taip pat sulimpa.

Vertinimas

Jei antikūnai yra derinami su tinkamu „Cooms“ serumu, serume esantys antikūnai (skysta kraujo dalis) jungiasi su paciento antikūnais. Antikūnai yra Y formos, tai reiškia, kad jie visada gali surišti du surišimo partnerius ir tokiu būdu susieti raudonuosius kraujo kūnelius. Susidaro didelis kraujo ląstelių kaupimasis. Šie gumulėliai tampa matomi - kraujas susikaupia (susikaupia) ir testas yra teigiamas.
Jei pacientas neturi tinkamų antikūnų, serumas išlieka skystas. Nematote jokių pokyčių - testas neigiamas.

Kokios yra alternatyvos?

Alternatyva Coombso testui yra imunologinis ELISA metodas (susietas su fermentais imunosorbentų tyrimas), kai tam tikri antikūnai žymimi fermentu. Šis antikūnas pridedamas prie tiriamojo tirpalo. Jei paženklinti antikūnai reaguoja su tiriamajame tirpale esančiais antikūnais, surištas fermentas aktyvuojamas ir gaunamas dažiklis. Atitinkami mėgintuvėliai keičia spalvą - testas teigiamas.

Be ELISA procedūros, taip pat yra WESTERN blot, kuris dažnai naudojamas kaip patvirtinantis teigiamos ELISA testas.